{"id":3545,"date":"2024-08-22T07:33:36","date_gmt":"2024-08-22T07:33:36","guid":{"rendered":"https:\/\/oligofastx.com\/?p=3545"},"modified":"2024-08-22T07:33:36","modified_gmt":"2024-08-22T07:33:36","slug":"tecnicas-de-purificacion-de-oligonucleotidos","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/oligofastx.com\/es\/tecnicas-de-purificacion-de-oligonucleotidos\/","title":{"rendered":"T\u00e9cnicas de purificaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos"},"content":{"rendered":"<p>Los oligonucle\u00f3tidos se utilizan en numerosas aplicaciones cient\u00edficas, desde la investigaci\u00f3n biom\u00e9dica hasta el desarrollo de f\u00e1rmacos. En todas ellas para que los oligonucle\u00f3tidos sean efectivos es esencial que est\u00e9n libres de impurezas.<\/p>\n<p>La purificaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos es, por tanto, un paso cr\u00edtico en su fabricaci\u00f3n. Es lo que se conoce como <em>downstream process <\/em>dentro del proceso de producci\u00f3n. A continuaci\u00f3n, exploramos las principales t\u00e9cnicas utilizadas para este prop\u00f3sito y su importancia en el campo de la biotecnolog\u00eda y la medicina.<\/p>\n<h2>Principales t\u00e9cnicas de purificaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos<\/h2>\n<h3>1. HPLC (High-Performance Liquid Chromatography)<\/h3>\n<p><strong>RP-HPLC (Reversed-Phase HPLC)<\/strong>: Esta t\u00e9cnica separa los oligonucle\u00f3tidos de menos de 50 bases de longitud bas\u00e1ndose en sus propiedades hidrof\u00f3bicas. Es muy eficaz para purificar tanto oligonucle\u00f3tidos modificados como no modificados. Su alta precisi\u00f3n (pureza del 90-95%) la convierte en una de las t\u00e9cnicas m\u00e1s utilizadas en la purificaci\u00f3n de oligos.<\/p>\n<p><strong>AEX-HPLC (Anion Exchange HPLC)<\/strong>: Utiliza interacciones de carga para separar los oligonucle\u00f3tidos seg\u00fan su longitud y carga. Esta t\u00e9cnica es ideal para obtener una alta resoluci\u00f3n en la purificaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos de diferentes longitudes.<\/p>\n<p>La cromatograf\u00eda l\u00edquida a alta velocidad (FPLC) es la t\u00e9cnica m\u00e1s utilizada ya que combina el uso de columnas cromatogr\u00e1ficas de diversos tipos como l afiltraci\u00f3n en gel, interacci\u00f3n hidrof\u00f3bica, intercambio i\u00f3nico y afinidad las cuales se conectan a un equipo automatizado equipado con un detector de luz UV-visible (190-700 nm) en l\u00ednea con hasta tres longitudes de onda simult\u00e1neas (e.g. 280\/214\/254 nm), un medidor de conductividad (0.001-999.9 mS\/cm), un mezclador de gradientes y un monitor de pH en l\u00ednea.<\/p>\n<h3>2. PAGE (Polyacrylamide Gel Electrophoresis)<\/h3>\n<p>PAGE es una t\u00e9cnica que ofrece una alta resoluci\u00f3n en la separaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos bas\u00e1ndose en su tama\u00f1o. Es especialmente \u00fatil cuando se necesita separar varios oligonucle\u00f3tidos m\u00e1s largos (de m\u00e1s de 50 bases) con diferencias en su secuencia. Aunque puede ser laboriosa, su precisi\u00f3n es inigualable (95-99 % de pureza).<\/p>\n<p><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"wp-image-3546 aligncenter\" src=\"https:\/\/oligofastx.com\/wp-content\/uploads\/2024\/08\/Purificacion-oligos-blog-oligofastx-2.jpg\" alt=\"\" width=\"833\" height=\"469\" srcset=\"https:\/\/oligofastx.com\/wp-content\/uploads\/2024\/08\/Purificacion-oligos-blog-oligofastx-2.jpg 1887w, https:\/\/oligofastx.com\/wp-content\/uploads\/2024\/08\/Purificacion-oligos-blog-oligofastx-2-711x400.jpg 711w, https:\/\/oligofastx.com\/wp-content\/uploads\/2024\/08\/Purificacion-oligos-blog-oligofastx-2-1400x788.jpg 1400w, https:\/\/oligofastx.com\/wp-content\/uploads\/2024\/08\/Purificacion-oligos-blog-oligofastx-2-768x432.jpg 768w, https:\/\/oligofastx.com\/wp-content\/uploads\/2024\/08\/Purificacion-oligos-blog-oligofastx-2-1536x864.jpg 1536w\" sizes=\"auto, (max-width: 833px) 100vw, 833px\" \/><\/p>\n<h3>Otras T\u00e9cnicas de Purificaci\u00f3n<\/h3>\n<p>Adem\u00e1s de las t\u00e9cnicas mencionadas existen otros m\u00e9todos para purificar oligonucle\u00f3tidos, como la desalado por columnas de exclusi\u00f3n por tama\u00f1o (SEC), que separa mol\u00e9culas bas\u00e1ndose en su tama\u00f1o, la ultrafiltraci\u00f3n y la purificaci\u00f3n por fase s\u00f3lida (SPE), que retiene oligonucle\u00f3tidos mientras se lavan las impurezas. Tambi\u00e9n se utilizan t\u00e9cnicas como el fosfato de celulosa, que emplea interacciones de carga para la separaci\u00f3n. Cada t\u00e9cnica tiene sus propias ventajas y se elige en funci\u00f3n de las caracter\u00edsticas espec\u00edficas del oligonucle\u00f3tido y las impurezas presentes.<\/p>\n<p>La purificaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos es esencial en el desarrollo de f\u00e1rmacos y terapias en la medicina personalizada. La precisi\u00f3n y eficacia de las t\u00e9cnicas de purificaci\u00f3n determinan la calidad y funcionalidad de los oligonucle\u00f3tidos, impactando directamente en la capacidad de desarrollar tratamientos personalizados para enfermedades complejas. Con el avance continuo de la biotecnolog\u00eda, la optimizaci\u00f3n de estas t\u00e9cnicas es fundamental para la mejora de la salud global.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\">Fuentes:<\/span><\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\"><a href=\"https:\/\/www.ibiantech.com\/consejos-elegir-correctamente-la-purificacion-sondas-oligos\/\">Consejos para elegir correctamente la purificaci\u00f3n de sondas y oligos<\/a><\/span><\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\"><a href=\"https:\/\/www.thermofisher.com\/es\/es\/home\/brands\/thermo-scientific\/molecular-biology\/molecular-biology-learning-center\/molecular-biology-resource-library\/spotlight-articles\/oligonucleotide-purification-methods.html\">Best Oligonucleotide Purification Methods for Your Research | Thermo Fisher Scientific &#8211; ES<\/a><\/span><\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\"><a href=\"https:\/\/www.genelink.com\/newsite\/products\/unmodoligosPURIFICATION.asp\">Oligo Purification: Reverse Phase Cartridge &#8211; RPC Polyacrylamide Gel Purification (PAGE) from Gene Link<\/a><\/span><\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\">Im\u00e1genes:<\/span><\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\"><a href=\"https:\/\/www.advion.com\/es\/qualitative-analysis-of-oligonucleotides-using-the-advion-interchim-scientific-hplc-uv-ms-system\/\">https:\/\/www.advion.com\/es\/qualitative-analysis-of-oligonucleotides-using-the-advion-interchim-scientific-hplc-uv-ms-system\/<\/a><\/span><\/p>\n<p><span style=\"font-size: 90%;\"><a href=\"https:\/\/www.waters.com\/blog\/es\/bringing-it-all-together-a-modern-solution-for-oligonucleotide-analysis\/\">https:\/\/www.waters.com\/blog\/es\/bringing-it-all-together-a-modern-solution-for-oligonucleotide-analysis\/<\/a><\/span><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Los oligonucle\u00f3tidos se utilizan en numerosas aplicaciones cient\u00edficas, desde la investigaci\u00f3n biom\u00e9dica hasta el desarrollo de f\u00e1rmacos. En todas ellas para que los oligonucle\u00f3tidos sean efectivos es esencial que est\u00e9n libres de impurezas. La purificaci\u00f3n de oligonucle\u00f3tidos es, por tanto, un paso cr\u00edtico en su fabricaci\u00f3n. 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